我们已经了解到，想要获取鱼类的生长信息，最为准确的方法就是读取耳石上同心环纹的数量、宽窄等信息。那么如何对耳石进行处理才能得到清晰的环纹呢？
由于耳石是具有一定厚度的碳酸钙晶体，大部分鱼类的耳石不经处理是无法直接观察到轮纹的，通常需包埋后进行薄切甚至研磨抛光后才能显示出清晰的轮纹。这就需要用到专业的仪器设备，对研究者的资金有一定的要求，且切割耳石程序相对繁琐、耗时不少。本期介绍的是一种简单的处理方法——烧蚀法（breakandburn），简便易行，价格美丽，还能得出高质量的结果，学到就是赚到！
通过烧蚀法得出的清晰耳石轮纹
实验前需要将耳石上粘附的一些鱼体组织去除干净，然后在室温下存放两周（或40°干燥），以确保实验时耳石是干燥状态，否则在加热时耳石受热不均可能会碎裂甚至炸裂崩飞。
然后用解剖刀沿耳石背腹轴、从核心位置切开（这点尤为重要，否则得到的生长信息是不完整的）。操作时最好在黑色的卡纸或者底托盘上，黑色的底色与乳白色的耳石对比明显，切耳石时任何细小的碎裂和缺失都能很容易注意到。切耳石时锯切产生的切面轮纹会更加清晰，且碎裂的可能性比简单的用力向下切小得多。
在黑色卡纸上切耳石
将切开的一半耳石放在刀片上在-°C的高温下灼烧几秒，以增强轮纹的可见度（也可直接灼烧耳石切割面）。实验者需有一定的经验才能准确把握灼烧时间，但也有一个“经验法则”，即刀片灼烧至“樱桃红色”时停止灼烧。
灼烧耳石
将灼烧后的耳石用密封胶固定在玻片上，切面朝下。固定时注意不要产生气泡影响观察。
多个耳石可以固定在同一个玻片上，不过最好统一方向，以便观察记录。观察鉴定年龄时，翻转载玻片，从切面处观察年轮（如下图）。
相比于需要切割机、研磨机等专业设备的方法，这种方法是不是简便得多？以上是新西兰渔业评估报告中对鳗鲡年龄与生长的研究使用的烧蚀法的具体步骤，然而在实际应用中，这个方法也不是一成不变的。在一项对方鲷的研究中，就用控温热台代替了用火焰直接灼烧；下面的操作视频中也是先灼烧再切开耳石。因此用怎样的步骤操作，还是要结合实验中的具体情况来选取。
在实验中具体要采用哪种方法要结合实际情况选择，可以参考下边的流程图。虽然烧蚀法简便快捷且结果可信，但切片法的准确性要更高。因此在时间和资金条件充足，或对精确度有很高的要求时，建议采用切片法。
Tips：烧蚀本质上利用的是耳石上明暗带间蛋白质含量的差异，暗带蛋白质含量高、透光差、在透射光下偏暗，明带则反之。烧蚀法即蛋白质烧蚀反应，使得暗带略微呈棕色，增强与明带的对比。有条件的，可进一步选用紫外光作为光源，即利用蛋白质荧光反应，日本有学者利用此技术鉴定星康吉鳗的年龄。耳石年龄鉴定中的其它处理方法，如染色、酸洗等，究其本质，也是利用明暗带间蛋白质含量差异引起的光学或化学特性差别。
参考文献：
[1]C.Walsh,M.P.Beentjes,G.Kelly..Agedeterminationprotocolforfreshwatereels(Anguilladieffenbachii,Anguillaaustralis)[J].TechnicalReport,
[2]GeorgiosVagenas,ParaskeviK.Karachle.sBCB(standardizedBurn-Crack-Burn):Astandardizedmodificationofburningmethodforotolithageestimation[J].FisheriesResearch,
视频来源：
